دانلود ترجمه مقاله استخراج DNA از بادام بدون فنول و نیتروژن مایع

1. مقدمه 2. مواد و روش ها 3. نتایج 4. بحث و بررسی

چکیده – استخراج DNA ژنومیک با کمیت و کیفیتی بالا یک نیاز اساسی در بیولوژی مولکولی است. این DNA به دست آمده، عاری از هر گونه آلودگی پروتئینی، پلی ساکارید، پلی فنول و رنگدانه های رنگی است. این ترکیبات با پروسه های جداسازی (ایزوله) ژنومیک و واکنش های پایین دستی نظیر آنالیز آنزیم بازدارنده و تقویت ژن تداخل پیدا می کنند. بر طبق یافته ها؛DNA ژنومیک ایزوله شده مناسب دیده شد چرا که این روش این ترکیبات را کاهش می دهد. از این رو، می توان از آن برای برای توالی مارکرهای بین ریزماهواره ای (ISSR) و شبیه سازی (کلونینگ) استفاده کرد. این پروتکل همچنین نیاز به نیتروژن مایع و فنول های سمی را نادیده می گیرد. در این روش، نرخ جذب A260/A280 دی ان ای استخراج شده بین 1.7 تا 1.8 بود. این پروتکل موارد بسیار و متعددی را تحت پوشش قرار می دهد. مقدمه: بادام متعلق به خانواده روزاسه است. 21 گونه بادام و 6 گونه دورگه طبیعی در مناطق آب و هوایی مختلف کشف شده اند (کد خدایی و دیگران.، 2010). تولید کننده اصلی بادام با تولید بیش از 400000 تن، ایران می باشد. به دنبال آن، ترکیه، آمریکا و سوریه از تولید کنندگان دیگر این محصول هستند (فوستات، 2004). در بسیاری از گونه های گیاهی، استخراج مقادیر بسیار با کیفیت و وزن مولکولی بالا DNA می تواند به دلیل مقادیر زیاد ترکیبات فنولی، سطوح بالای DNA و وجود مقادیر زیادی از ارگانل DNA با چالش همراه باشد (لوتز و دیگران.، 2011). با استفاده از روش CTAB اصلاح شده دویل و دویل (1987) ، استخراج DNA توصیف شده، از برگ های بادام امکان پذیر است. استخراج این DNA از خود بادام به دلیل وجود مقادیر بالا مواد متابولیک ثانویه مثل پلی فنول ها، پلی ساکارید ها، کینون، تانین ها، که در طی فرایند جداسازی با فرایند های استخراج DNA ، فعالیت آنزیم های DNA، اندونوکلئاز های محدود کننده تداخل خواهند کرد بسیار مشکل است (میشلز و دیگران، 2003).

Genomic DNA extraction with a high quantity and quality is a basic requirement in molecular biology. The DNA obtained was free of any contamination proteins, polysaccharide, polyphenols and colored pigments. These compounds would interfere with the genomic isolation procedures and downstream reactions such as restriction enzyme analysis and gene amplification. The isolated genomic DNA was found suitable since this method reduce these compounds. Hence, it can be employed for preparations inter sample sequence repeats (ISSR) and cloning. The protocol also excludes the need for liquid nitrogen and toxic phenols. In this method. A260/A280 absorbance ratio of extracted DNA was 1.7 to 1.8. The protocol covers many and divers. Introduction: Almond belongs to the family of Rosaceae. Twenty-one almond species and six natural hybrids grown in different climatic regions have been found (Kadkhodaei et al., 2010). The main world producer is Iran with more than 400,000 tons followed by Turkey, USA and Syria (Faostat, 2004). In many plant species, extracting large amounts of high quality, high molecular weight DNA can be a challenge due to high amounts of phenolic compounds, high levels of DNA and the presence of large amounts of organellar DNA (Lutz et al., 2011). With the modified Doyle and Doyle (1987) CTAB method, it is feasible to extract qualified DNA from leaves of almond. It is difficult to obtain from almond because of its high amounts of secondary metabolic substances such as polyphenols, polysaccharides, quinone and tannins, which would interfere with DNA extraction procedures and the activity of DNA enzymes and restriction endonucleases (Michiels et al., 2003). During an isolation procedure.